Re: [問卦] 基因定序的原理?
※ 引述《fifthfloorme (躌艛)》之銘言:
: 標題: [問卦] 基因定序的原理?
: 時間: Wed Sep 8 14:44:42 2021
:
: 小妹文組,想問基因定序為什麼要那麼多天?
:
: 我以為就是把基因拿去顯微鏡底下觀察一下欸!生物課不是都有萃取過DNA嗎?
:
: 還是說,要放大很多倍才能看得清楚序列呢?求解!
關於基因檢測的相關全條目,初版是我10年前寫的,好像沒被其他編輯者改多少:
https://reurl.cc/EZK4eA
歡迎內行的各位幫忙編修~ ^^
這邊我要挑一點特別提出來給各位版友認識,基因定序之父是台灣人: 陳弈雄博士
: → Goog1e: 生物課萃取DNA?????? 150.116.147.25 09/08 14:45現在的萃取DNA實驗,已經到小學生自然課就有做過了喔~
: 推 Neisseria: 用定序儀跑的。要跑一至兩週 112.105.246.64 09/08 14:48不用,純做實驗、上機跑數據的話,一天以內(正確來說,幾小時內)就出來了~
整個過程最花時間的是採樣送件及確認受檢者的"跑病例流程"階段。 <=人文的
問題永遠比做科學的實驗還複雜。
現在科技進步很快,基因定序儀已經到第四代了,一個人的"全基因圖譜"才需要
跑到幾天。
: → SRadiant: 跑1、2週是20年前的事吧... 111.82.244.251 09/08 14:4910年前的事.... 20年前是多個國家,上百的研究團隊跑了數年。
現在科技進步很快的。 ^^
: 推 vaya: 推 要用電顯。 選我正姐 39.11.36.226 09/08 14:51電顯也看不到"分子"層次,DNA可是分子鏈....
: 推 owlonoak: 20年前還沒有完全定序這種技術 220.143.192.200 09/08 14:51嗯.... 也不是這麼說......
: 推 Neisseria: 所以現在定序要多久?一至三天? 112.105.246.64 09/08 14:52做實驗不用,但整個流程(含採檢、送樣、實驗、上機、出報告....等全部)可能要。
: 推 LukaDoncic: 要先RT 再PCR 再送NGS 再用程式分析se 35.130.71.243 09/08 14:52RT跟PCR是一起的.... 而且真有需要用到RT?
: → SRadiant: 記什麼,因為有3萬個左右所以要花一些 111.82.244.251 09/08 14:52: → SRadiant: 時間 111.82.244.251 09/08 14:52: → LukaDoncic: quence 可能還要重複幾次 35.130.71.243 09/08 14:52: 推 scps990607: 搜尋「次世代定序NGS」了解一下 27.242.135.137 09/08 14:53GJ ^^
: 推 kavengany: DNA電泳慢慢跑 223.139.161.184 09/08 14:53這實驗不用跑電泳。
: 推 gn01657736: DNA才問世30年,技術還不成熟一堆文 49.217.198.4 09/08 14:53看你說的技術是哪種... 比如剪接的技術確實還不純熟(基因治療)。
但論定序,它的發展已經很久、很熟了。
: → gn01657736: 組,ATGC就一堆人就看不懂了 49.217.198.4 09/08 14:53: → SRadiant: 病毒幾萬個鹼基完整定序沒問題啊 111.82.244.251 09/08 14:54沒錯~ 不過PCR永遠有個問題,就是在複製的時候會出錯。
: 推 owlonoak: 其實上面有一個鄉民還真的說對了 220.143.192.200 09/08 14:54: → owlonoak: 真的是叫DNA排好報數 220.143.192.200 09/08 14:54: → owlonoak: 是長度從一個鹼基到最後一個鹼基這樣 220.143.192.200 09/08 14:55: → owlonoak: 檢查這一堆長度不等的DNA的最末端鹼基 220.143.192.200 09/08 14:55: → owlonoak: 這就是目前定序的原理 220.143.192.200 09/08 14:56: → SRadiant: NGS出來也快20年囉,2003年就有發表一 111.82.244.251 09/08 14:56: → SRadiant: 個腺病毒全基因組 111.82.244.251 09/08 14:5710年
: 推 duckie: Sanger定序法 應該不會用到NGS 60.251.121.124 09/08 14:57: → duckie: NGS太貴了 60.251.121.124 09/08 14:57你內行!!
: 推 pastoris: 採後萃取蛋白質體,用delta序列當引子作 150.116.67.54 09/08 14:58: → pastoris: PCR,結果sequence分析 150.116.67.54 09/08 14:58...... 翠蛋白質體???? 你確定???? (@[email protected])?
: → SRadiant: 病毒基因體很小,不貴,而且公家的錢 111.82.244.251 09/08 14:58只要做分子實驗,沒有不貴的~
: 推 pastoris: 那會用什麼作primer夾出來? 150.116.67.54 09/08 15:03: → SRadiant: https://i.imgur.com/oKP7BNV.jpg 111.82.244.251 09/08 15:03
: → SRadiant: 台灣不知不覺也上傳一堆序列了,剛剛還 111.82.244.251 09/08 15:04: → SRadiant: 看到有人說定序會不會造假... 111.82.244.251 09/08 15:04: → SRadiant: https://i.imgur.com/7SnEEYq.jpg 111.82.244.251 09/08 15:04: → SRadiant: 有些資訊比較齊全的,會有定序技術,像 111.82.244.251 09/08 15:05: → SRadiant: 這個是用Illumina Iseq 111.82.244.251 09/08 15:05: → SRadiant: Illumina iseq 100的話就是NGS 111.82.244.251 09/08 15:07你內行~ GJ~ ^,^--
我印象啥小sanger法
大神
你太專業了
推
請問要怎麼分離人和病毒的DNA呢
更正,應該是RNA?
有特定序列可以用primer夾,跑電泳切膠、PCR...等,我懂得是老套的做法,需要 RNA的量比較大,不然光過程就被降解掉一堆了,以前做RNA的研究的人很辛 苦。 現在有很多KIT可以用,不需要我懂得那種老方法了,你可以去查一查 一些廠商提供的RNA KIT。
我生化被當的咖QQ
分生是現在的科科人的顯學,你生化不好好讀,分生就別想過了....
不需要RT嗎? 冠狀病毒不是RNA病毒嗎?
還是現在RNA也可以直接pcr?
不是討論病毒基因體嗎?你說幾十個國家
那是人類基因體
喔,我以為你在談"歷史",在講之前的人類基因體的事.... 病毒基因體小,很容易測完,但要抓有意義的片段就好,多抓的是沒意義的~ 反而干擾你做研究分析~
10年前病毒基因體1、2天就有,不用1~2週
分生是20年前科科人的顯學,現在就基本功
也對啦~ 現在是基本功了~ 時代的眼淚~ (Q_Q)
要RT
我以為已經有新產品可以替代這老方法了.... 現在還是要RT啊... (=..=) 沒有我想像中的進步得快啊....
自從human genome proejct 完成之後 科科
你也不想想該內容是我10幾年前寫的~ 既然是內行人,有空幫我編修啦~
現在能不轉成cDNA就PCR?
人改玩各種 -omics 然後又回到整體論層次
有one step RT-PCR臨床有沒有用不知道
的生物學研究
我只是好奇同時做你要怎麼分離RNA RT可以特
別辨識polyA tail
因為你抽的時候也得到非mRNA的東西
第四代?我只認識第三代nano pore? 第四代
不是還在開發中 商用了嗎?
RNA抽出來不RT會不會很容易裂解,應該不會
有人這麼勇敢吧
人文(x) 人為/人事/行政流程(o)
病毒基因體小,確實(比較)便宜啦!
推
如果是PCR我懂一點,萃取病毒的RNA後
會轉錄成DNA再進行PCR
英國變種的源頭抓到但媒體都不報
專業推
推專業文
電顯當然看得到分子,只是不會用來定序
可以敲碗下一篇文章嗎!!! 敲敲!!
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